三級甲等綜合醫(yī)院國營
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(1)樣品提取同前列腺素測定法。
(2)取8mm×75mm玻璃管,總計數(shù)管(T)加PBS300μl,非特異結合管(NSB)加PBS200μl,零標準管(S0)加PBS100μl,標準曲線管(S1~7)加不同濃度標準工作液100μl,測定管加經(jīng)純化樣品液100μl。
(3)向S0、S1~7和測定管加稀釋抗血清100μl,放4℃6~12h。
(4)向所有管各加[3H]-TXB2工作液100μl,放4℃6~12h。
(5)除T管外,各加活性炭分離劑100μl,混勻后放4℃15min,離心3500r/min(4℃)15min。
(6)將上清液全部傾出至預先加有11ml閃爍液的計數(shù)瓶中,充分混合,放置12h后在液體閃爍計數(shù)器上測量放射性。
(7)在半對數(shù)坐標紙上以LogitB/B0為縱坐標,各標準管TXB2(pg)為橫坐標,按直線回歸法繪制標準曲線,然后依樣品管的LogitB/B0值從標準曲線上求出樣品管濃度,如液體閃爍計數(shù)器帶有數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),可直接給出標準曲線,有關參數(shù)及樣品管濃度。
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