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幽門螺旋桿菌的免疫學(xué)檢測-檢查項目-大眾養(yǎng)生網(wǎng)

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幽門螺旋桿菌的免疫學(xué)檢測

基本信息

  • 專科分類： 生長發(fā)育檢查
  • 檢查分類： 血液檢查
  • 適用性別： 男女均適用
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手術(shù)參考價： 45元
  • 科　室： 生長發(fā)育檢查

幽門螺旋桿菌的免疫學(xué)檢測檢查簡介

幽門螺桿菌免疫學(xué)檢查是通過測定血清中的幽門螺旋桿菌抗體來檢測幽門螺旋桿菌感染，包括補被動血凝測定、免疫印跡技術(shù)和酶聯(lián)合吸附測定(ELISA)等。

幽門螺旋桿菌的免疫學(xué)檢測檢查過程

一、被動血凝測定

患者刺取腦脊液，采用稀釋抗原固定血清法用96孔V型微量血凝板,將乙腦抗原作倍比稀釋,使每孔含25uL,被檢血清用稀釋液作1：10稀釋,每孔加人25uL產(chǎn),再滴加凍干乙腦單克隆抗體致敏羊血紅細胞25uL，37℃下放置數(shù)小時后觀察結(jié)果。

二、免疫印跡技術(shù)

(一)蛋白質(zhì)樣品獲得：細菌誘導(dǎo)表達后，可通過電泳上樣緩沖液直接裂解細胞，真核細胞加勻漿緩沖液，機械或超聲波室溫勻漿0.5-1min。然后4℃，13,000g離心15min。取上清液作為樣品。

(二)電泳：制備電泳凝膠，進行SDS-PAGE。

(三)轉(zhuǎn)移：(半干式轉(zhuǎn)移)

1、電泳結(jié)束后將膠條割至合適大小，用轉(zhuǎn)膜緩沖液平衡，5min×3次。

2、膜處理：預(yù)先裁好與膠條同樣大小的濾紙和NC膜，浸入轉(zhuǎn)膜緩沖液中10min。

3、轉(zhuǎn)膜：轉(zhuǎn)膜裝置從下至上依次按陽極碳板、24層濾紙、NC膜、凝膠、24層濾紙、陰極碳板的順序放好，濾紙、凝膠、NC膜精確對齊，每一步去除氣泡，上壓500g重物，將碳板上多余的液體吸干。接通電源,恒流1mA/cm2，轉(zhuǎn)移1.5hr。轉(zhuǎn)移結(jié)束后，斷開電源將膜取出,割取待測膜條做免疫印跡。將有蛋白標準的條帶染色，放入膜染色液中50s后，在50%甲醇中多次脫色，至背景清晰，然后用雙蒸水洗，風(fēng)干夾于兩層濾紙中保存，留與顯色結(jié)果作對比。

(四)免疫反應(yīng)：

1、用0.01MPBS洗膜，5min×3次。

2、加入包被液，平穩(wěn)搖動，室溫2hr。

3、棄包被液，用0.01MPBS洗膜，5min×3次。

4、加入一抗(按合適稀釋比例用0.01MPBS稀釋，液體必須覆蓋膜的全部)，4℃放置12hr以上。陰性對照，以1%BSA取代一抗，其余步驟與實驗組相同。

5、棄一抗和1%BSA，用0.01MPBS分別洗膜，5min×4次。

6、加入辣根過氧化物酶偶聯(lián)的二抗(按合適稀釋比例用0.01MPBS稀釋)，平穩(wěn)搖動，室溫2hr。

7、棄二抗，用0.01MPBS洗膜，5min×4次。

8、加入顯色液，避光顯色至出現(xiàn)條帶時放入雙蒸水中終止反應(yīng)。

三、酶聯(lián)合吸附測定

常用的ELISA法有雙抗體夾心法和間接法，前者用于檢測大分子抗原，后者用于測定特異抗體。

1.間接ELISA

本法主要用于檢測抗體。間接ELISA的操作程序如下。

(1)材料

①包被液、洗滌液、保溫液、底物液、終止液;

②DVH包被抗原、酶標抗抗體、陰性及陽性DVH參考血清.

③ELISA檢測儀、加樣器、聚苯乙烯微量板。

(2)方法步驟

①加抗原包被→4℃過夜，洗滌三次、拋干

②加待檢血清→37℃2小時，洗滌三次、拋干

③加酶標抗體→37℃2小時，洗滌三次、拋干

④加底物液→37℃30分鐘，加終止液

⑤用ELISA檢測儀測定OD值，并計算出P/N比值。

2.雙抗體夾心ELISA

本法主要用于檢測大分子抗原。

①加抗體包被→4℃過夜，洗滌三次、拋干

②加待檢抗原→37℃30分鐘，洗滌三次、拋干

③加酶標抗體→37℃30分鐘，洗滌三次、拋干

④加底物液→37℃15分鐘，加終止液

⑤用ELISA檢測儀測定OD值。

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推薦問答

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答

肺囊蟲肺炎（Pneumocystis Pneumonia，簡稱PCP）和肺孢子蟲肺炎（Pneumocystis Jirovecii Pneumonia，簡稱PJP）實際上是同一種疾病，只是病原體的命名有所更新。過去稱為肺囊蟲，現(xiàn)在則被命名為肺孢子蟲（Pneumocystis jirovecii）。這種肺炎主要影響免疫系統(tǒng)受損的人群，如艾滋病患者或長期使用免疫抑制劑的患者。臨床表現(xiàn)包括干咳、發(fā)熱、呼吸急促和低氧血癥。診斷通常需要通過痰液或支氣管肺泡灌洗液的微生物學(xué)檢測。治療上，盡管病原體名稱有所變化，但治療方案基本保持一致，主要采用抗真菌藥物如復(fù)方磺胺甲惡唑等。

問貼墻站立鍛煉的正確姿勢是什么？
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貼墻站立鍛煉是一種簡單有效的身體矯正方法。正確的姿勢如下：首先，選擇一面平坦的墻壁，背對墻壁站立。腳跟、臀部、背部和頭部應(yīng)緊貼墻壁，腳跟與墻壁之間保持約一拳的距離。兩腳并攏，腳尖向外約45度。雙臂自然下垂，手掌貼于大腿外側(cè)。下巴微收，目視前方。保持這個姿勢，深呼吸，感受背部肌肉的拉伸和腹部肌肉的收緊。每次站立時間可以根據(jù)個人情況逐漸增加，從幾分鐘開始，逐漸延長至30分鐘或更長時間。

問漱口水應(yīng)在刷牙前還是刷牙后使用？
答

漱口水的使用時機應(yīng)根據(jù)其具體作用和成分來確定。對于含有抗菌成分的漱口水，建議在刷牙后使用，因為刷牙可以去除牙齒表面的大部分食物殘渣和細菌，而漱口水則能進一步減少口腔中的細菌，幫助預(yù)防牙周病和齲齒。對于不含抗菌成分的漱口水，如僅用于清新口氣或緩解口腔不適，可以在刷牙前后使用，以個人喜好和需求為準。重要的是，漱口水不應(yīng)替代刷牙和使用牙線，而是作為口腔衛(wèi)生維護的輔助手段。

問牙齒剖面分為哪幾層？
答

牙齒剖面分為三層結(jié)構(gòu)：牙釉質(zhì)、牙本質(zhì)和牙髓。牙釉質(zhì)是牙齒最外層的硬組織，主要由礦物質(zhì)組成，具有高度的抗磨損性和保護性。牙本質(zhì)位于牙釉質(zhì)下方，是構(gòu)成牙齒主體的主要部分，含有牙本質(zhì)小管，與牙髓相連。牙髓位于牙齒的中心，包含神經(jīng)、血管和淋巴組織，負責(zé)牙齒的營養(yǎng)供應(yīng)和感覺傳導(dǎo)。這三部分共同構(gòu)成了牙齒的結(jié)構(gòu)，維持牙齒的功能和健康。

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答

心理治療是一種經(jīng)過科學(xué)驗證的有效治療方法，它通過與專業(yè)治療師的交流和互動，幫助個體識別和解決心理問題，改善情緒狀態(tài)，增強應(yīng)對壓力的能力。心理治療可以針對各種心理障礙，如焦慮、抑郁、創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙等，通過認知行為療法、精神分析、人本主義療法等多種技術(shù)，促進個體心理的健康發(fā)展。研究表明，心理治療對于許多心理問題具有顯著的療效，且副作用較小，是一種重要的非藥物治療手段。

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