三級甲等綜合醫院國營
北京協和醫院是集醫療、教學、科研于一體的現代化綜合三級甲等醫院,是國家衛生健康委指定的全國疑難重癥診治指導中心,最早承擔高干保健和外賓醫療任務的醫院之一,也是高等醫學教育和住院醫師規范化培訓國家 級
1.玻片法常用于鑒定菌種及菌型,如葡萄球菌、肺炎鏈球菌、沙門菌屬、志賀菌屬、致病性大腸埃希菌、霍亂弧菌、腦膜炎奈瑟菌等的鑒定。
(1)原理:用已知的診斷血清或血漿在玻片上與待檢菌及生理鹽水混合,若出現肉眼可見的特異性凝集塊,表示該菌為相應的細菌。
(2)方法:取一潔凈載玻片,用接種環取待檢菌培養物,分別與診斷血清及生理鹽水混勻,上下搖動玻片數次,l~3min后觀察結果。
(3)結果判斷:陽性一待檢菌明顯凝集,對照菌均勻混濁。陰性一待檢菌及對照菌均勻混濁。自凝一測定菌、對照菌均凝集。
(4)注意事項:某些細菌菌體表面常有一層表面抗原,如傷寒沙門菌的vi抗原及志賀菌屬的K抗原等。它能阻抑菌體抗原與抗血清的凝集,從而導致假陰性結果。此時應將菌懸液于100℃中煮沸1h,以破壞其表面抗原,然后再做試驗。
2.試管法此法可排除玻片法凝集試驗的非特異性凝集,是一種半定量凝集試驗。
(1)方法:取小試管10支,第1管加入生理鹽水0.45ml,再加入0.05ml診斷血清混勻,其余各管均加生理鹽水0.25m|,然后從第1管中吸出0.25ml加入第2管中,混勻后再吸出0.25ml加入第3管,依次類推至第9管,從第9管吸出0.25ml棄去,第l0管不加抗血清為對照管。每管加待檢菌菌液0.25ml,充分震蕩混勻后,置37℃水箱浴中4h,再置4℃中過夜。
(2)結果判斷:以血清最高稀釋度達到(++)凝集者(管內液體澄清,部分凝集塊沉于管底)為該菌的凝集效價。若此效價所用原診斷血清效價一半以上者為陽性。
(3)注意事項:腦膜炎奈瑟菌的菌液必須經56℃30min滅活,以破壞自溶酶。若試驗出現低凝集結果時,應將該菌傳代數次后,再作試驗。
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